細胞培養(yǎng)的相關(guān)知識分享

　　細胞培養(yǎng)技術(shù)又稱單細胞分離培養(yǎng)技術(shù)，即在體外將一個細胞從細胞群中分離出來，使其能夠復(fù)制成一個新的細胞群培養(yǎng)體系。由單個細胞形成的細胞群稱為克隆，純化后的細胞群稱為細胞系，即細胞培養(yǎng)。
 

　　各細胞的遺傳和生物學(xué)特性非常相似和一致，有利于不同細胞群形態(tài)和功能的比較研究。
 

　　菌落(克隆)計數(shù)：在倒置顯微鏡下觀察、計數(shù)直徑大于75μm或含有50個以上細胞的克隆。
 

　　血細胞計數(shù)板細胞數(shù)/ml=4個大正方形細胞總數(shù)/4×104
 

　　細胞計數(shù)器/細胞分析儀(凱西，德國)
 

　　細胞活力0.4%臺盼藍染色
 

　　MTT法可用于評價細胞的相對數(shù)量和活性
 

　　細胞的冷凍保存和復(fù)蘇：
 

　　低溫保存：4℃緩慢冷凍60分鐘(可延長)
 

　　-20℃下40-60分鐘(不能太長，可以跳過*)
 

　　-80℃(半年內(nèi)轉(zhuǎn)液氮/過夜)程控冷卻儀表1-3℃/min轉(zhuǎn)液氮
 

　　復(fù)蘇：38℃溶解，注意水面不能接觸凍存管蓋邊
 

　　上清液以低速(500轉(zhuǎn)/分)離心除去，加入相同的培養(yǎng)基，輕輕吹掃上清液，接種于適當大小的培養(yǎng)瓶中。